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磷酸吡哆醛依赖型天冬氨酸α-脱羧酶的研究

莫芹; 李由然; 石贵阳 江南大学生物工程学院; 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室; 江苏无锡214122

关键词:磷酸吡哆醛 酶学性质 詹氏甲烷球菌 

摘要:β-丙氨酸作为一种重要的平台化合物,是合成含氮化合物的前体。相较于化学合成法,人们更倾向于利用L-天冬氨酸-α脱羧酶(ADC)环保地制备β-丙氨酸。由于细菌来源的ADC存在严重的机理性底物失活,限制了其在工业上的应用。实验在大肠杆菌中表达了3种古细菌来源的ADC,纯化和测定了其对于L-天冬氨酸的脱羧活性。考察了来源于詹氏甲烷球菌的重组酶(ADCM.j)的酶学性质和辅酶磷酸吡哆醛的稳定性,进行了酶转化实验。重组酶ADCM.j的比酶活为6.87U/mg,最适温度和pH分别为80℃和8.0,具有很强的热稳定性,适合用于工业生产。这类磷酸吡哆醛依赖型ADC,酶催化中没有基于机理的底物失活作用,但其辅酶的稳定性和循环利用是其酶催化中的主要限制因素。

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