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细胞培养氨基酸稳定同位素标记-质谱技术测定槲皮素对人肝癌细胞热休克蛋白表达的影响

周进 方丽 姚文秀 赵新 魏阳 周行 谢华 王理扬 陈俐娟 四川省肿瘤医院肿瘤内科 成都610041 成都医学院第·附属医院消化内科 四川人学华西医院肿瘤中心

关键词:槲皮素 hepg2细胞 热休克蛋白 

摘要:目的观察槲皮素对人肝癌细胞HepG2中热休克蛋白(HSP)发达的影响,为其抗肿瘤活性探寻可能的靶点。方法经过连续传代,充分氚化HepG2细胞中的亮氨酸,并鉴定其标记率。采用四早基偶氮唑蓝(MTT)法检测槲皮素对HepG2细胞中的亮氨酸,并鉴定其标记率。采用四早基偶氮唑蓝(MTT)法检测槲素对HepG2细胞生长的抑制活性及有效浓度。以50μmol/L槲皮素作用氚化HepG2细胞45h后,与正常HepG2细胞按1:1等量混合电泳,提肽后时行质谱鉴定,将获得的肽片段数据进行Mascot检索。结论SILAC-MS成熟可靠,能全面定量分析外因作用前后HepG2细胞中全系列蛋白谱的变化,槲皮素对HepG2细胞中HSP表现出强烈的抑制能力,并且这种作用可能是其发挥肿瘤活性的途径之一。

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