FTY720诱导多发性骨髓瘤细胞株U266自噬与凋亡的研究

关键词：免疫抑制剂 fty720 多发性骨髓瘤 细胞凋亡 自吞噬作用 

摘要：目的探讨新型免疫抑制剂FTY720对多发性骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡及自噬的影响，并探讨相关的作用机制。方法0、2．5、5．0、10．0及20．0μmol／LFTY720处理U266细胞24h后，应用CCK_8方法检测不同浓度FTY720对U266细胞生存率的影响；20．0μmol／LFTY720分别处理细胞0、2、6及24h，通过CCK-8方法检测FTY720作用不同时间对U266细胞生存率的影响。同时应用流式细胞术AnnexinV—FITC／PI染色检测相应的细胞凋亡率。不同浓度FTY720处理U266细胞后，应用Western blot法检测微管相关蛋白轻链3（LC3）B的表达，明确应用FTY720后是否引起细胞发生自噬。FTY720单用或联合应用自噬抑制剂Bafilomycin A1处理U266细胞24h，检测细胞生存率及凋亡率，并检测其对抗凋亡因子survivin表达的影响。结果应用FTY720后，U266细胞生存明显受抑制，可引起细胞发生凋亡，作用呈浓度及时间依赖性。LC3B-Ⅱ表达明显增加，呈浓度依赖性，表明FTY720可引起细胞发生自噬。应用自噬抑制剂Bafilomycin A1后，可解救FTY720引起的细胞生存抑制及凋亡，同时可解救FTY720引起的survivin表达下降。结论FTY720可引起U266细胞发生凋亡及自噬，自噬对凋亡具有促进作用。其机制可能为通过自噬在溶酶体降解了survivin等抗凋亡因子或其上游调控因子，从而促进细胞凋亡。

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