关键词：癌 肝细胞 羟基脲 p53 启动子 

摘要：目的探讨羟基脲对不同p53状态肝癌细胞的GADD45β诱导差异及可能调控机制。方法转染p53全序列建立Hep3B＋p53；体外合成GADD4513近端启动子序列群（-618～-314），构建荧光素表达质粒，转染肝癌细胞株HepG2、Hep3B和Hep3B＋p53；以实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）比较羟基脲对GADD4513表达诱导及其近端启动子活性影响差异；比较对DNA合成和细胞克隆形成能力抑制差异；通过Caspase-3的表达变化测定凋亡的发生和发展。结果羟基脲对Hep3B中GADD45诱导并不明显，转染p53全基因序列后，Hep3B＋p53对羟基脲的敏感性明显增加，并呈现出剂量-效应的正相关。荧光素分析提示羟基脲作用Hep3B＋p53后的启动子核转录因子（NF）-κB（-618／＋6）和E2F-1（-470／＋6）活性较Hep3B明显增强约1．1倍和0．8倍。羟基脲能够更加明显地抑制Hep3B＋p53的DNA合成能力和细胞克隆形成能力，10mmol／L羟基脲对Hep3B＋p53DNA合成抑制率达到37．15％，对细胞克隆形成能力的抑制率达85．29％，与Hep3B比较差异有统计学意义（P〈0．05）。羟基脲作用后Hep3B＋p53的Caspase-3能够迅速地启动凋亡的发生和发展。结论p53对核糖核苷酸还原酶抑制性化疗药物对肝癌细胞的GADD45诱导起重要作用，增强转录调节因子的表达水平是其可能的作用机制。

中华实验外科杂志要求:

{1}作者姓名在文题下按序排列，排序应在投稿时确定，在编排过程中不应再作更动；作者单位名称和邮政编码脚注于同页左下方。

{2}论文必须是符合学术规范、未曾公开出版的原创作品。

{3}正文中表示标题级别的序号形式，一般从大到小依次为：“一”“（一）”“1”“（1）”“①”等。可以根据标题的实有级别，跳过某些形式的序号。

{4}参考文献列在文末，以中括号编码，按照文中引文出现的先后顺序排列，不单独分中外文。同一文献只出现一次。禁止将一部参考文献标注多个序列号。

{5}中文摘要：字数为150-200字。中文关键词：选取3-5个文章核心术语。

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社