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鹿流行性出血热病毒实时荧光RT-RPA检测方法的建立

林彦星; 花群俊; 史卫军; 黄超华; 曹琢福; 张彩虹; 阮周曦; 曾少灵; 杨俊兴; 花群义 深圳海关动植物检验检疫技术中心; 广东深圳518045; 云南省武定县动物疫病预防控制中心; 云南武定651601

关键词:鹿流行性出血热病毒 快速检测 

摘要:为建立一种快速检测鹿流行性出血热病毒(EHDV)的实时荧光RT-RPA检测方法,本研究根据EHDV保守的非结构蛋白NS1基因(segment 5)设计特异性引物和探针,建立了敏感、快速的EHDV核酸实时荧光RT-RPA检测方法。结果显示,该方法特异性强,能准确检测EHDV核酸,与蓝舌病病毒(BTV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)等病原核酸无交叉反应;敏感性高,本试验中最低可检测到8×10~1copies/μL;检测时间短,仅需15 min;重复性好。采用所建立方法对115份样品进行检测,结果与OIE推荐的实时荧光RT-PCR法检测结果相同。上述结果表明,本研究建立的实时荧光RT-RPA快速检测法操作简便,可用于基层实验室快速检测。

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