鸡源产气荚膜梭菌重组酶聚合酶扩增检测方法的建立

关键词：产气荚膜梭菌 重组酶聚合酶扩增技术 荧光定量检测 鸡坏死性肠炎 

摘要：为建立鸡源产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的快速诊断方法,本研究以产气荚膜梭菌α-毒素的编码基因plc为基础设计、合成引物和探针,并以real-time PCR的方法进行验证,建立了鸡源产气荚膜梭菌的重组酶聚合酶扩增(RPA)检测方法。该方法可在38℃、25 min内对产气荚膜梭菌的α-毒素编码序列进行快速特异性扩增,最低检测限量可达1×10^1copies/μL,灵敏度良好。以此方法检测实验室保存的临床样本,其检测结果与real-time PCR的检测结果一致。上述结果表明,本研究建立的real-time RPA方法在检测鸡源产气荚膜梭菌时具有操作简单、快速灵敏的特点,适用于鸡源产气荚膜梭菌的临床检测。

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