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基于不同重组小反刍兽疫病毒N蛋白建立的双抗原S-ELISA抗体检测方法的比较研究

孙雨; 宋晓晖; 肖颖; 李秀梅; 吕园园; 王睿男; 蒋菲; 孙航; 杨林; 王传彬 中国动物疫病预防控制中心; 北京102600; 重庆动物疫病预防控制中心; 重庆400000; 洛阳现代生物技术研究院有限公司; 河南洛阳471000

关键词:原核表达载体 小反刍兽疫 核衣壳n蛋白 双抗原夹心elisa 比较 

摘要:为探索建立小反刍兽疫病毒抗体双抗原夹心ELISA方法的原料,本研究成功使用pET-30a与p ET-32a两个不同原核载体分别表达与纯化了小反刍兽疫病毒核衣壳蛋白N抗原。使用不同原核载体表达的N抗原组合建立的双抗原夹心ELISA抗体检测方法、相同原核载体表达的N抗原组合建立的双抗原夹心ELISA抗体检测方法、N抗原包被建立的抗体间接ELISA检测方法以及血清中和试验方法分别对已知背景的小反刍兽疫抗体阳性血清与小反刍兽疫抗体阴性血清进行检测。综合考虑方法的敏感性、特异性和稳定性,最终选择用不同原核载体表达的pET-30a-(N)与pET-32a-(N)抗原组合建立的小反刍兽疫病毒抗体双抗原夹心ELISA检测方法。

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