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建立检测疟疾的微滴数字PCR方法

赵明惠; 吴健; 王宁; 韩颖; 刘伟; 徐铁龙; 张强; 冉鑫 江西国际旅行卫生保健中心; 江西南昌330002; 广东国际旅行卫生保健中心; 上海之江生物科技股份有限公司; 江西省疾病预防控制中心

关键词:微滴数字pcr 疟疾 数字pcr 荧光定量pcr 

摘要:目的建立适合口岸疟疾检测的微滴数字PCR方法。方法根据文献中检测疟原虫的特异性引物和探针,建立检测疟疾的微滴数字PCR方法,与普通PCR及荧光定量PCR进行比较,评估微滴数字PCR的优越性。结果微滴数字PCR检测下限为0.721ng/μl,灵敏度比普通PCR高10倍,与荧光定量PCR相当;微滴数字PCR的重复性高于普通PCR,但不如荧光定量PCR稳定。检测的准确性方面,普通PCR对37份已知样本的检测准确率为75.68%,微滴数字PCR和荧光定量PCR均能达到100.00%。结论建立了检测疟疾的微滴数字PCR方法,比普通PCR方法灵敏度、重复性及准确性均有很大优势。

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