关键词：伪狂犬病病毒 潜伏感染 细菌人工染色体克隆 半乳糖激酶 lap1 

摘要：伪狂犬病病毒感染猪后,在耐过猪中均能形成潜伏感染。在潜伏感染期间,病毒基因组仅大量转录病毒潜伏相关转录物(latency-associated transcripts,LATs)。为了研究潜伏相关转录物启动子对LAT表达特征的影响,通过构建缺失LAT启动子LAP1、并添加绝缘子cHS4的供体质粒,利用感染性细菌人工染色体克隆(bacterial artificial chromosome,BAC)操作平台和galK(半乳糖激酶)正负筛选系统,获得BAC载体pBAC-JS-cHS4-△LAP1b,BAC载体与质粒pcDNA3.1-cre共转染Vero细胞后获得突变病毒vJS-cHS4-△LAP1b。空斑和生长曲线结果显示,vJS-cHS4-△LAP1b与亲本病毒具有相似的生物学特性。vJS-cHS4-△LAP1b感染Vero细胞后,RT-PCR检测显示表达大的潜伏相关转录本(large latency transcripts,LLT)。vJS-cHS4-△LAP1b的构建为深入研究LAT表达特征及功能提供了依据和基础。

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