关键词：cdkl5 人胶质母细胞瘤细胞 shrna 细胞生长 细胞周期 

摘要：目的探讨敲减周期蛋白依赖型激酶样5(cyclin-dependent kinase-like 5,CDKL5)对人胶质母细胞瘤细胞生长和细胞周期的影响,为胶质母细胞瘤的治疗提供新思路。方法本研究使用人胶质母细胞瘤细胞U87,使用慢病毒感染的方法敲减CDKL5基因。利用Western blot显示CDKL5的细胞定位以及特异性的小发卡RNA敲减效率。使用血细胞计数法绘制4 d U87的细胞生长曲线,同时利用MTT检测细胞活性。使用流式细胞仪技术检测细胞周期。结果在U87人胶质母细胞瘤细胞中,CDKL5在细胞核和细胞质当中都有表达,我们发现使用shRNA敲减CDKL5后,胞质中的CDKL5显著减少,细胞形态也发生明显改变。敲减CDKL5同时抑制人胶质母细胞瘤细胞的体外增,引起细胞周期停滞。结论敲减CDKL5可以显著抑制人胶质母细胞瘤细胞增殖,引起细胞周期停滞,为人胶质母细胞瘤的治疗提供了一个新的理论方法。

中风与神经疾病杂志要求:

1.全文字数　论著字数不限，提倡言简意赅；讲座和综述5 000~7 000字；临床经验1 500~3 500字；病例报告不超过2 500字。

2.字体　正文用5号宋体，行距1.5倍。

3.文题　各栏目稿件均须附中、英文文题。中文文题不宜超过25个汉字。

4.作者　论著栏目文章实行通信作者（correspondingauthor）负责制。通信作者一般是课题负责人或研究生导师，应熟悉论文的全部内容，对文章负全部责任。其他栏目的文章不设通信作者。通信作者的姓名、性别及职称以脚注的形式列于论文首页的下方。作者姓名放在文题下方，作者名之间用空格分开。在作者姓名下方列出单位全称、科室、所在省市和邮政编码。有多个作者来自不同单位时，在作者姓名的右上方加注阿拉伯数字。集体署名必须在文章后列出执笔者和通信作者。英文摘要中的中国人名用拼音形式，如李小明，写为LIXiao-Ming。及时作者以脚注的方式列出姓名、性别、学位和职称。为了支持多中心协作研究项目，各协作单位的及时作者可并列为该文的及时作者。

5.摘要　论著和综述/讲座须有350字以内的中、英文摘要，采用第三人称撰写。其中论著类文章的中英文摘要采用结构式，内容包括“目的”“方法”“结果”和“结论”；综述/讲座类文章摘要采用叙述式。英文摘要还应加文题、全部作者姓名、及时作者科室、单位、所在城市、邮政编码和国名及通信作者（或及时作者）的Email地址。

6.关键词　在中、英文摘要之后，均须列出2~5个中、英文关键词，各词之间用“；”分隔。关键词尽量使用美国国立图书馆编辑的新版IndexMedicus中的医学主题词（MeSH）内所列出的词。关键词必须包含研究对象。

7.正文　“前言”要反映出本研究的先进性和可行性，在阐明研究背景和理论、列出重要参考文献的基础上提出假说和研究目的。“材料与方法”应介绍实验对象的选择及各（亚）组的例数、仪器与试剂（注明产地和厂家）、研究或实验方法及步骤。实验步骤应提供足够的细节以便他人重复。“结果”按逻辑顺序描述，不要重复图表中的数据。“讨论”必须紧扣研究目的，围绕结果进行分析，以揭示事物的本质，作出恰如其分的结论。

8.表格　表格按照正文中出现的次序连续编号，随文编排。每张表格必须有表题。表格采用三横线表，如有统计学处理数据需要列出时，可在底线上加一细横线，表注用上标“a，b，c…”表示。表中要有各（亚）组的例数；英文缩写均要在表注中写出全称。

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