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构建表达Flag-GPI的重组乙型肝炎病毒载体

胡孔颖; 谷陈建; 吴敏乐; 陶帅; 刘楠楠; 刘晶; 谢幼华 复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系; 教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室; 上海200032; 上海市浦东医院; 复旦大学附属浦东医院检验科; 上海201399

关键词:乙型肝炎病毒 5c3c 糖基磷脂酰肌醇 重组乙型肝炎病毒载体 

摘要:乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是小型的嗜肝DNA病毒,能够特异性地感染人肝实质细胞。HBV的易感性可以归于多个方面,包括细胞表面的受体以及细胞内的蛋白或其他因子,目前对HBV易感性的了解还有待深入。本课题利用课题组原有的HBV 5c3c载体和糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)的特性,构建了重组HBV载体5c3c-CD59-Flag-GPI和5c3cT-Flag-GPI,转染Huh7细胞后可以将Flag标签锚定在细胞膜上,且可利用Flag抗体通过流式细胞术对其进行分选。在回补HBV包膜蛋白的情况下,5c3cT-Flag-GPI能包装形成完整的重组HBV颗粒。本研究为后续优化重组HBV的包装效率,进而为HBV易感性研究提供工具并奠定基础。

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