关键词：黄色链霉菌 放线菌素d 启动子a4 接合转移 

摘要：【背景】放线菌素D是神经母细胞瘤、绒毛膜上皮癌和横纹肌肉瘤等恶性肿瘤的特效药,黄色链霉菌TRM45540是一株产放线菌素D的高产菌株。【目的】通过导入强启动子A4,以期提高黄色链霉菌合成放线菌素D的产量。【方法】将强启动子A4整合到质粒pSET152中,转化到大肠杆菌,通过大肠杆菌与黄色链霉菌TRM45540的接合转移,将启动子A4片段插入黄色链霉菌中,采用高效液相色谱法对接合子TRM45540::pYS001和野生菌株TRM45540进行发酵产物中放线菌素D的比较分析。【结果】启动子A4片段成功插入到黄色链霉菌TRM45540::pYS001,与原始菌株相比,在相同发酵条件下放线菌素D的产量提高了26.85%,产量达821.8mg/L。【结论】强启动子A4能够促进黄色链霉菌高产放线菌素D。

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