贻贝足丝蛋白的汞、镉抗性及富集机制

关键词：基因工程 翡翠贻贝 足丝蛋白 基因克隆 转录组学 

摘要：为探究贻贝足丝蛋白黏附重金属的机理及分子机制,对翡翠贻贝足丝蛋白进行转录组测序分析,使用Trinity软件从头组装,获得73 571个UniGenes.翡翠贻贝足部的UniGenes注释到基因本体(gene ontology,GO)数据库,共获得9 466个注释结果,通过基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)数据库注释后,发现有955个UniGenes被注释到关于黏着斑蛋白的通路中,推测足丝蛋白吸附重金属的功能与其密切相关.由于Pvfp6半胱氨酸、组氨酸和酪氨酸含量高,该蛋白可能对重金属有结合作用。将 pvfp6 基因克隆到pET-30a表达载体,转到大肠杆菌BL21 (DE3)表达。结果表明,含有pET-30a-pvfp6 质粒的宿主具有一定的抗汞和抗镉能力,能分别在含Hg^2+质量浓度为5mg/L,或者含Cd^2+质量浓度为160 mg/L的培养基中生长;重组菌对Hg^2+和Cd^2+的平衡富集量均高于对照组pET-30a,分别为109.89 mg/g和19.27mg/g.研究表明,足丝蛋白Pvfp6赋予了重组菌具有一定的抗汞和抗镉的能力,且富集能力增强.该研究可为海洋环境中重金属污染的生物治理奠定实验基础。

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