关键词：人脐带间充质干细胞 低氧 增殖 sirtuin 

摘要：目的 探讨低氧对人脐带间充质干细胞（h UC-MSCs）中Sirtuin（SIRT）蛋白表达影响及与细胞增殖的关系。方法 组织块贴壁法分离和培养h UC-MSCs;流式细胞仪鉴定细胞表面标志物;CCK-8法测定低氧与常氧下不同时间点h UC-MSCs的增殖能力;流式细胞仪检测低氧与常氧下细胞周期的变化;免疫荧光与Western blotting测定低氧与常氧下细胞SIRT蛋白定位与表达。结果 成功分离h UC-MSCs;细胞CD90、CD105、CD29、CD44高表达,CD14、CD19、CD34、CD45、HLA-DR无表达;CCK-8测定低氧培养24、48、72 h细胞的增殖能力均高于常氧培养（P均〈0.05）;在低氧下培养24、48 h后S期细胞比率高于常氧培养（P均〈0.05）;免疫荧光检测SIRT1、6位于细胞核内,SIRT2定位于胞浆,SIRT3、4、5定位于线粒体。Western blotting测定SIRT1在低氧培养24、48 h蛋白表达量均高于常氧条件（P均〈0.05）,常氧培养72 h的SIRT1表达量高于24 h及48 h（P均〈0.05）;SIRT2表达量在低氧培养24 h高于常氧培养（P〈0.05）,48 h后低于常氧培养,72 h后高于常氧培养（P〈0.05）;低氧培养24、48、72 h后SIRT5的表达量均高于常氧处理（P均〈0.05）,常氧与低氧培养细胞48 h和72 h后均高于24 h时SIRT5的表达（P均〈0.05）。结论 低氧处理24、48、72 h均可以促进h UC-MSCs的增殖。低氧诱导SIRT1、2与5表达改变提示SIRT1、2、5可能参与了低氧对h UC-MSCs增殖的调控。

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