关键词：壳聚糖 纳米基因载体 基因治疗 

摘要：目的构建载重组表达质粒pVAX1/TatPTD-endostatin壳聚糖纳米基因载体并评价其抑制内皮细胞增殖的活性。方法 选用真核表达质粒pVAX1为重组载体,采用PCR及双酶切法制备能够表达TatPTD-endostatin融合蛋白的真核表达载体pVAX1/TatPTD-endostatin;离子交联法制备壳聚糖载基因纳米粒,琼脂糖凝胶电泳筛选处方,检测纳米粒的形态、Zeta电位及粒径;采用最佳处方比例制备载重组质粒纳米载体,转染人脐静脉内皮细胞HUVEC,采用ELISA法测定分泌型TatPTD-Es蛋白的表达量,CCK-8测定对HUVEC的抑制作用,以上两个实验均以LipofectaminTM2000为阳性对照。结果 pVAX1/TatPTD-endostatin的真核表达载体构建成功,壳聚糖纳米粒粒径（145±12）nm,Zeta电位（14.3±1.6）mV,纳米粒转染HUVEC后细胞上清中TatPTD-endostatin的浓度为（182.5±16.3）ng/mL,壳聚糖基因载体转染HUVEC后对细胞有明显的抑制作用,72h的抑制率达（53.4±5.4）%。结论 构建的壳聚糖纳米基因载体能够成功转染HUVEC并能明显地抑制细胞的增殖。

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