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K亚群禽白血病病毒多克隆检测抗体的制备和特性分析

王呈呈; 冉英; 肖雅之; 李涵; 胡卫国; 邱建华; 李宏梅; 郭慧君 山东农业大学动物科技学院; 山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室; 山东泰安271018

关键词:k亚群禽白血病病毒 gp85基因 多克隆抗体 

摘要:为制备识别K亚群禽白血病病毒(ALV-K)兔源多克隆抗体,将含ALV-K gp85基因的表达质粒在大肠杆菌体内进行诱导表达,获得含his标签的大小为55KD的重组蛋白;将纯化后的表达蛋白免疫接种5只青年兔,三次加强免疫后检测收获血清抗体,ELISA检测血清抗体效价;对血清抗体进行纯化并检测抗体亚型,Western-blot和IFA检测抗体对ALV-Kgp85蛋白和病毒识别特性。结果表明,获得的抗体效价达到8×107,抗体亚型为IgG2b,该抗体能够特异性识别ALV-K gp85蛋白和DF1细胞中的ALVK病毒,可以用于IFA临床检测,为K亚群禽白血病的快速检测奠定了基础。

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