关键词：木薯 高亲和性硝酸根转运蛋白 基因克隆 表达分析 

摘要：木薯具有高产、耐旱、耐贫瘠等特点,为了解其耐贫瘠的作用机理,提高木薯在贫瘠土壤中对氮素的利用率,以30 d龄的“华南8号”组培苗为实验材料,采用同源克隆技术获得1个高亲和性硝酸根转运蛋白基因NRT2。生物信息学分析结果表明,该基因开放阅读框全长1 479 bp,编码492个氨基酸,命名为MeNRT2.5。MeNRT2.5蛋白有10个跨膜区域,与橡胶树、油桐树、可可树等物种的NRT2.5蛋白具有较高的同源性,其氨基酸序列相似性分别为94%,89.84%,87.40%。半质量RT-PCR结果表明,MeNRT2.5基因在根、茎、叶、花等各个器官均有表达,在成熟木薯植株的根中和组培苗的叶中表达量较高。实时荧光定量RT-PCR分析表明,MeNRT2.5在低浓度NO 3^-(0.3 mmol·L^-1)处理后,其在根中的表达量在6 h时达到峰值;高浓度NO 3^-(3 mmol·L^-1)处理后,其表达量在根茎叶中均没有明显变化,即该基因的表达被高浓度NO 3^-所抑制。该研究结果为进一步分析MeNRT2.5在木薯中的功能验证奠定理论基础。

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