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慢病毒介导RNA干扰沉默OPN基因抑制低氧引起的SD大鼠肺动脉血管平滑肌细胞增殖

刘川川; 刘辉琦; 曹学锋; 刘杰; 吴穹; 王生兰 青海大学医学院; 青海西宁810001

关键词:rna干扰 低氧 骨桥蛋白 肺动脉平滑肌细胞 

摘要:目的观察慢病毒介导RNA干扰沉默骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)基因对低氧刺激下SD大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法SD大鼠肺动脉平滑肌细胞分为四组:常氧对照组、低氧对照组、低氧+空病毒组、低氧+OPN沉默组,分别采用MTY法检测各组细胞的增殖能力,实时荧光定量法检测各组细胞OPNmRNA的表达情况,WesternBlotting法检测各组细胞OPN蛋白表达水平。结果2%低氧环境培养PASMCs细胞48h,可使OPN的mRNA和蛋白表达量较常氧对照组增高,细胞增殖能力增强,差异有显著性(P〈0.05);肺动脉平滑肌细胞慢病毒感染72h后低氧培养48h,可使OPNmRNA相对表达量和蛋白表达量均低于低氧对照组和低氧+空病毒组,且细胞的增殖能力降低,差异有显著性(P〈0.05)。结论低氧刺激可使OPN表达量增加、肺动脉平滑肌细胞增殖;慢病毒介导RNA干扰沉默OPN基因可抑制低氧刺激引起的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖。

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