关键词：缺氧微环境 宫颈癌 二氯化钴 

摘要：目的： 研究在缺氧微环境下人宫颈癌Hela细胞中缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子A（VEGF-A）的表达。方法： 采用CoCl2构建Hela细胞体外缺氧微环境模型，使用CCK8法来检测细胞的增殖；使用实时荧光定量PCR法分别来检测HIF-1α和VEGF-A mRNA表达的变化；免疫细胞化学技术检测HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达。结果： CCK8检测结果发现，CoCl2诱导的缺氧微环境能降低Hela细胞的增殖活性，随着CoCl2浓度的增加其增殖活性逐渐降低，在150 μmol/L时降到最低，各浓度组间总体差异有统计学意义（F = 10.118，P = 0.001，P 〈 0.05），在相同CoCl2浓度构建的缺氧微环境中，随着缺氧时间的延长，其细胞增殖活性逐渐降低，在12 h降至最低，而后增殖活性增加，各时间组总体差异有统计学意义（F = 9.727，P = 0.002，P 〈 0.005）。实时荧光定量PCR结果发现同对照组比较，缺氧处理3 h， HIF-1α和VEGF-A的mRNA表达无明显差异（P = 0.86，P = 0.72，P ＞ 0.05）；随着缺氧时间增加，HIF-1α的mRNA表达在12 h时达峰值，随后下降，各时间组比较差异有统计学意义（F = 1.627，P ＜ 0.001）。VEGF-A mRNA表达随着缺氧时间的增加逐渐增加，各时间组比较差异有统计学意义（F = 7.407，P ＜ 0.001）。HIF-1α和VEGF-A在mRNA表达水平上无相关性（r = 0.647，P 〉 0.05）；免疫细胞化学检测发现，在150 μmol/LCoCl2构建的缺氧微环境下，随着时间延长HIF-1α蛋白表达逐渐增加，在12 h达到峰值，而后下降（F = 100.930，P 〈 0.001）；VEGF的蛋白表达随时间延长而逐渐增加（F = 118.336，P 〈 0.001）。HIF-1α和VEGF-A在蛋白表达水平上呈正相关（r = 0.892，P 〈 0.05）。结论：CoCl2诱导的缺氧微环境能使Hela 细胞中HIF-1α的表达，促进其下游靶基因VEGF-A在mRNA及蛋白水平表达升高。

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