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PadR对须糖多孢菌丁烯基多杀菌素生物合成及转运相关蛋白表达的影响

何思颖; 柏丹; 夏伦; 万千千; 罗粤雯; 邱玉玲; 夏立秋 湖南师范大学生命科学学院; 微生物分子生物学湖南省重点实验室; 淡水鱼类发育生物国家重点实验室; 中国长沙410081

关键词:须糖多孢菌 padr 转录调控因子 转运蛋白 丁烯基多杀菌素 

摘要:为研究padR基因表达对须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)次级代谢产物生物合成及相关蛋白表达的影响,在对须糖多孢菌基因组测序结果的基础上,从基因组中克隆了padR基因上、下游同源臂,利用融合PCR将硫链丝菌素抗性基因插入上、下游同源臂之间,将融合片段与穿梭载体pOJ260连接,构建敲除载体pOJ260-UHA-tsr-DHA。通过接合转移将其导入野生型须糖多孢菌中,通过同源臂双交换获得须糖多孢菌敲除菌株S.pogona-ΔpadR。经HPLC检测分析,敲除菌株次级代谢产物丁烯基多杀菌素产量与原始菌株相比提高了27.3%,且有7个转运相关蛋白出现表达上调。这一研究表明padR基因的敲除能够有效促进须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成。该研究对优化须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成途径具有一定的指导意义,为研究padR基因表达在链霉菌次级代谢产物合成中的作用打下了基础。

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