关键词：bmscs 

摘要：目的采用去卵巢法建立骨质疏松模型,并研究模型中miR-150的表达情况及其影响骨质疏松过程的可能机制。方法选取C57BL/6J采用卵巢摘除法建立骨质疏松模型,micro CT检测模型中骨质情况,并分离BMSCs细胞,流式细胞仪检测BMSCs表面抗原检测结果,MTT生长曲线和克隆形成情况鉴定BMSCs细胞增殖情况,RT-PCR检测模型中miR-150、RUNX-2的表达情况,转染miR-150 mimics和inhibitor后RT-PCR和Western Blot检测细胞中RUNX-2的表达情况,成骨诱导及碱性磷酸酶(ALP)染色和茜红素检测不同处理组成骨能力变化情况。结果处理2个月后实验组骨小梁明显减少,稀疏,断裂,骨含量下降;BMSCs克隆数及细胞增殖能力6 d、8 d后显著降低,miR-150内源性表达异常升高,两组BMSCs表型CD29、CD44阳性,CD34、CD45阴性。模型建立成功后,实验组中RUNX-2表达显著降低,inhibitor抑制miR-150表达后,RUNX-2表达升高,miR-150 mimics组结果变化趋势与miR-150 inhibitor组相反。与对照组相比,mimics组ALP染色结果变浅,表达降低,而inhibitor组染色变深,表达升高。结论在成骨诱导过程中,miR-150可作为成骨负性调控因子,通过影响RUNX-2的表达影响成骨分化。

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