血管内皮生长因子定量检测试剂盒的研制

关键词：血管内皮生长因子类 试剂盒 抗体 单克隆 

摘要：目的 研制血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）检测试剂盒（酶标法）.方法 以一株特异性抗VEGF单克隆抗体作为捕获抗体,另一株单克隆抗体作为检测抗体,通过棋盘滴定法确定两抗体的最佳浓度组合.制备冻干VEGF165参考品,并对样本稀释液、封闭液等实验条件进行优化.检测自制试剂盒的特异性并对其进行初步应用.结果 棋盘滴定法确定捕获抗体的质量浓度为10μg/ml,检测抗体的稀释倍数为1：20 000.冻干VEGF165的质量浓度为720～880 pg/ml,样本间变异系数〈10%.以5%牛血清白蛋白作为封闭液和样本稀释液最为合适.自制试剂盒与10种细胞因子均无交叉反应,具有较高的特异性和灵敏度.结论 成功研制出VEGF检测试剂盒.

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