关键词：活性构象 应答调控蛋白 

摘要：PhoB是PhoR/PhoB双组分信号转导系统(TCS)中的应答调控蛋白,来自大肠杆菌,可以参与环境中自由Pi的调控应答.PhoB拥有保守的磷酸化位点D53,当Mg^2+存在时,会变成活性构象,但是其中的机理尚不清楚.目前已经有报道指出,自由态的应答调控蛋白存在少量的活性构象,而且它们和蛋白的激活过程相关,但是这种活性构象一般不稳定,很难观测到.本文以PhoBN^F20D作为模型,1H-15NHSQC和19F NMR谱图显示,自由态PhoBN^F20D在溶液中存在pre-active构象,BeF3^-可以稳定这种活性构象,而且Mg^2+可以促进非活性构象到活性构象之间的转化,在BeF3^-存在的情况下可以使PhoBN^F20D形成完全的活性构象.同时我们利用Carr-Purcell-Meiboom-Gill(CPMG)弛豫弥散实验证明了PhoBN^F20D存在两态交换.

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